PEPCK（EC 4.1.1.32）廣泛存在于動物、開花植物、藻類、部分真菌和細菌中。該酶催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷 酸烯醇式丙酮酸，是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶?。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測生物樣本中PEPCK的活性。其原理是PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+。NADH在340nm有特征吸收峰，相反NAD+在該波長無吸收峰，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性。
酶標儀或紫外分光光度計（能測340nm處的吸光度）及恒溫箱
96孔UV板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：如果能夠排除下面的幾個問題，那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強，將底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定，失活；
3、ECL底物沒覆蓋到相應(yīng)位置；
4、一抗選擇不當；
5、二抗失活。
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