-
Q-PCR實驗中熔解曲線異常
解決方案：
1.優(yōu)化引物設(shè)計，提高退火溫度。
2.使用探針法減少非特異性擴增。
-
Q-PCR實驗中Ct值過高
解決方案：
1.增加模板量或優(yōu)化反應(yīng)條件。
2.檢查引物效率和特異性
-
Q-PCR實驗中污染問題
解決方案：嚴格分區(qū)操作（樣品準(zhǔn)備區(qū)、反應(yīng)配制區(qū)、擴增區(qū)），避免使用污染的移液槍和試劑。
-
Q-PCR實驗中RNA反轉(zhuǎn)錄問題
解決方案：
1.使用無RNase的試劑和耗材。
2.優(yōu)化反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件。
-
Q-PCR實驗中標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差
解決方案：
1.重新稀釋模板，確保梯度準(zhǔn)確。
2.檢查引物效率和反應(yīng)條件。
-
Q-PCR實驗中熒光信號弱
解決方案：檢查熒光染料和探針質(zhì)量。或增加探針\染料濃度。
-
Q-PCR實驗中重復(fù)性差
解決方案：確保加樣準(zhǔn)確，混勻反應(yīng)體系。
-
Q-PCR實驗中擴增效率低
解決方案：重新設(shè)計引物或優(yōu)化反應(yīng)體系（如Mg2?濃度）。
-
Q-PCR實驗中非特異性擴增
解決方案：優(yōu)化引物設(shè)計，提高退火溫度。或使用探針法（如TaqMan）提高特異性。
-
Q-PCR實驗中無擴增信號
可能原因：
1.模板濃度過低或降解。
2.引物設(shè)計不佳或反應(yīng)條件不適。
