脯氨酸(PRO)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，逆境條件下，植物體內(nèi)PRO含量顯著增加。脯氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同，分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS，Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase）是以谷氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關(guān)鍵酶，對植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測生物體內(nèi)吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）活性，其原理是吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）催化谷氨酸生成吡咯啉-5-羧酸（P5C）過程中分解ATP生成ADP和無機(jī)磷，通過鉬酸銨比色法測定單位時間內(nèi)產(chǎn)生無機(jī)磷的量來測定P5CS活性。
酶標(biāo)儀或分光光度計（能測660nm處的吸光度）及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
制冰機(jī)、低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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可能原因 解決措施是
1，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確。 確保標(biāo)準(zhǔn)品按照推薦方法溶解和稀釋。
2，移液不準(zhǔn)確。 定期校準(zhǔn)移液器并檢查槍頭密封性。
3，反應(yīng)液蒸發(fā)。 用封板膜密封酶標(biāo)板。
4，洗板不徹底。 足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5，孔底有異物。 讀數(shù)前清潔板底。
可能原因 解決措施是
1，試劑反應(yīng)不充分 確保孵育時間并按推薦溫度孵育
2，試劑體積添加不足 檢查移液器并嚴(yán)格按照操作步驟操作
3，稀釋不正確 檢查試劑稀釋步驟
4，酶結(jié)合物失活 混合酶結(jié)合物和底物，通過顯色反應(yīng)檢查
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