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本試劑盒提供了簡單又快速的免染12.5%SDS-PAGE 彩色(紅色)凝膠配制試劑，采用上層膠(也稱濃縮膠、積層膠)和下層膠(也稱分離膠)的預混配方， 只需加入改良型促凝劑即可快速制備凝膠， 避免的傳統制膠法中TEMED 的惡臭味，保護了實驗人員的身體健康，可在短時間內制備多塊凝膠，無需計算所需溶液量，無需稀釋，操作簡便。且使用本產品所配置的上層膠帶有顏色(紅色)，使得蛋白點樣孔清晰呈現，實現了加樣過程的可視化，極大的提高了加樣效率，有利于點樣和控制電泳進程。本產品上層膠中的(紅色)染料可在上層膠中穩定存在，不會隨著電泳而遷移至下層膠，不會影響電泳和蛋白染色效果， 電泳完成后也便于識別上層膠并切除。本產品所制備的凝膠為免染PAGE膠，蛋白條帶紫外曝光即可成像，無需染膠，也不影響后續Western Blot等實驗。

本產品的改良型促凝劑具有更好的穩定性和催化效能，配制過程中無需額外添加 TEMED。為確保實驗效果和方便吸取使用， 已開蓋使用過的改良型促凝劑可置于 4°C 保存至少 3 個月。

本試劑盒可制備厚度 0.75mm 常規尺寸的凝膠50 塊，具體配制的凝膠塊數量與凝膠的厚薄以及凝膠大小有關。

(以一塊 0.75/1.0/1.5mm 的 mini 膠為例)

1.   取等體積下層膠溶液和下層膠緩沖液沖液，各2.0/2.7/4.0mL,輕輕混勻。

2.   向步驟 1 的混合溶液中加入40/60/80μl的改良型促凝劑，輕輕混勻。

3.   將步驟 2 的混合溶液注入制膠玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長0.5cm即可，加入適量水或醇(如乙醇、異丙醇等)覆蓋于下層膠之上。(此溶液為過量，請勿全部注入，可留少許以判斷凝膠狀態)

4.   待下層膠凝固后(約15min)，倒去上層水或醇。(當水或醇和膠之間有一條折射線時，說明膠已凝固)

5.   取等體積上層膠溶液和彩色上層膠緩沖液，各0.5/0.75/1.0mL，輕輕混勻。(由于染料的特殊理化性質，使用前請搖勻)

6.   向步驟 5 的混合溶液中加入10/15/20μl的改良型促凝劑，輕輕混勻。

7.   將步驟 6 的混合溶液注入制膠玻璃板中，插入梳齒。

8.   待上層膠凝固后(約15min)，拔去梳齒即可用于電泳。

9.   電泳結束后，即可將凝膠從玻璃板中取出，放入成像儀紫外(波長 302nm)曝光成像，或在紫外切膠臺上直接觀察。 (注意：紫外激發熒光基團一般需1-5min，凝膠上即可呈現清晰的蛋白條帶。觀察Western Blot轉印后膜上蛋白條帶，必須在電泳后，將凝膠經紫外激發出現清晰條帶后，再進行轉膜操作。若直接轉膜再用紫外激發，熒光信號會很弱或無信號。)  

1. 請盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。

2. 本產品制備出的上層膠和下層膠與傳統的濃縮膠和分離膠配方一致，針對10-60kDa的蛋白都能有很好的濃縮和分離效果，如果針對更大分子量的蛋白，建議選用普美克的10%免染SDS-PAGE彩色凝膠快速配制試劑盒(PMK1014C)效果更好；針對更小分子量的蛋白，建議選用普美克的15%免染SDS-PAGE彩色凝膠快速配制試劑盒(PMK1017C)效果更好。

3. 改良型促凝劑的使用量僅作參考，實際用量可根據個人實驗習慣和經驗調整，加入較多量的促凝劑可加速凝膠，反之亦然。

4. 凝膠速度與溫度有顯著的正相關性。同等條件下，溫度越高，凝膠速度越快，室溫過高時建議適當減小改良型促凝劑的用量，室溫較低時，可適當延長凝膠時間。

5. 本產品已加入適量 TEMED的替代品，如需進一步加速凝膠，臨配膠前可按需補充適量 TEMED。

6. 在配膠之前，使膠溶液及緩沖液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘)，可有效避免凝膠中氣泡的形成。

7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

8. 本產品僅限于專業人員的科學研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。