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本試劑盒提供了簡單又快速的免染8%SDS-PAGE 彩色(紅色)凝膠配制試劑，采用上層膠(也稱濃縮膠、積層膠)和下層膠(也稱分離膠)的預(yù)混配方，只需加入改良型促凝劑即可快速制備凝膠， 避免的傳統(tǒng)制膠法中TEMED的惡臭味，保護(hù)了實(shí)驗(yàn)人員的身體健康，可在短時(shí)間內(nèi)制備多塊凝膠，無需計(jì)算所需溶液量，無需稀釋，操作簡便，無需壓膠操作。且使用本產(chǎn)品所配置的上層膠帶有顏色(紅色)，使得蛋白點(diǎn)樣孔清晰呈現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)了加樣過程的可視化，極大的提高了加樣效率，有利于點(diǎn)樣和控制電泳進(jìn)程。本產(chǎn)品上層膠中的(紅色)染料可在上層膠中穩(wěn)定存在，不會隨著電泳而遷移至下層膠，不會影響電泳和蛋白染色效果， 電泳完成后也便于識別上層膠并切除。本產(chǎn)品所制備的凝膠為免染PAGE膠，蛋白條帶紫外曝光即可成像，無需染膠，也不影響后續(xù)Western Blot等實(shí)驗(yàn)。

本產(chǎn)品的改良型促凝劑具有更好的穩(wěn)定性和催化效能，配制過程中無需額外添加 TEMED。為確保實(shí)驗(yàn)效果和方便吸取使用， 已開蓋使用過的改良型促凝劑可置于 4°C 保存至少 3 個(gè)月。

本試劑盒可制備厚度 0.75mm 常規(guī)尺寸的凝膠50 塊，具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠大小有關(guān)。

(以一塊 0.75/1.0/1.5mm 的 mini 膠為例)

1.   取等體積下層膠溶液和下層膠緩沖液沖液，各 2.0/2.7/4.0mL,輕輕混勻。

2.   向步驟 1的混合溶液中加入 40/60/80μl 的改良型促凝劑，輕輕混勻。

3.   將步驟 2的混合溶液注入制膠玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長 0.5cm 即可。

4.   取等體積上層膠溶液和彩色上層膠緩沖液，各 0.5/0.75/1.0mL,輕輕混勻。(由于染料的特殊理化性質(zhì)，使用前請搖勻)

5.   向步驟4 的混合溶液中加入10/15/20μl的改良型促凝劑，輕輕混勻。

6.   灌制完下層膠，無需壓膠，無需等待下層膠凝固，立即在下層膠液上面，緩慢將步驟5 的混合溶液注入制膠玻璃板中，注意請勿過快，否則會沖散下層膠液面，灌滿后插入梳子待凝固（約15min）。7.   待凝膠全部凝固后，拔去梳齒即可進(jìn)行后續(xù)電泳試驗(yàn)。

8.   電泳結(jié)束后，即可將凝膠從玻璃板中取出，放入成像儀紫外(波長 302nm)曝光成像，或在紫外切膠臺上直接觀察。 (注意：紫外激發(fā)熒光基團(tuán)一般需1-5min，凝膠上即可呈現(xiàn)清晰的蛋白條帶。觀察Western Blot轉(zhuǎn)印后膜上蛋白條帶，必須在電泳后，將凝膠經(jīng)紫外激發(fā)出現(xiàn)清晰條帶后，再進(jìn)行轉(zhuǎn)膜操作。若直接轉(zhuǎn)膜再用紫外激發(fā)，熒光信號會很弱或無信號。)

1. 請盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。

2. 本產(chǎn)品制備出的上層膠和下層膠與傳統(tǒng)的濃縮膠和分離膠配方一致，針對30-150kDa的蛋白都能有很好的濃縮和分離效果，如果針對更小分子量的蛋白，建議選用普美的10%一步法免染SDS-PAGE彩色凝膠快速配制試劑盒(PMK1014D)效果更好。

3. 灌注上層膠溶液一定要輕緩，避免將上層膠溶液沖入下層膠，上層膠溶液注入后，輕輕振動制膠架，即可使上下層膠分界線平齊。膠凝固后上下層膠分界線平整度略弱于傳統(tǒng)方法配的膠，但對后續(xù)電泳沒有影響。

4. 改良型促凝劑的使用量僅作參考，實(shí)際用量可根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和經(jīng)驗(yàn)調(diào)整，加入較多量的促凝劑可加速凝膠，反之亦然。

5. 凝膠速度與溫度有顯著的正相關(guān)性。同等條件下，溫度越高，凝膠速度越快，室溫過高時(shí)建議適當(dāng)減小改良型促凝劑的用量，室溫較低時(shí)，可適當(dāng)延長凝膠時(shí)間。

6. 本產(chǎn)品已加入適量 TEMED 的替代品，如需進(jìn)一步加速凝膠，臨配膠前可按需補(bǔ)充適量 TEMED。

7. 在配膠之前，使膠溶液及緩沖液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘)，可有效避免凝膠中氣泡的形成。

8. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

9. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。