對木質(zhì)化較高的根、莖等植物組織進(jìn)行石蠟切片時(shí)，組織較硬脆，需要對組織進(jìn)行相應(yīng)的軟化后，方能得到組織薄片。傳統(tǒng)軟化劑多以氫氟酸或甘油的水溶液為軟化劑，甘油溶液軟化時(shí)間較長，一般需3周以上。氫氟酸腐蝕性強(qiáng)、毒性大，二者對組織的軟化程度和切片效果多無法準(zhǔn)確掌控，不利于廣泛應(yīng)用。本軟化液針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新植物組織軟化劑及使用方法，本軟化劑揮發(fā)性小，無刺激性氣味，毒性小，軟化時(shí)間短，軟化時(shí)間較甘油軟化液縮短兩周，軟化時(shí)間可根據(jù)組織大小精確把握，軟化后的組織適于石蠟切片。
1.將植物組織離體后經(jīng)過FAA固定液固定48h以上后，將固定液移除。
2.加入軟化劑進(jìn)行軟化，軟化劑的加入量和軟化時(shí)間控制如下：
①軟化劑的加入量以將組織完全浸泡為準(zhǔn)。
②軟化時(shí)間以4mm直徑葡萄根為基準(zhǔn)軟化7天，組織直徑每增加1mm，軟化時(shí)間增加1天。
3.軟化后的組織在進(jìn)行石蠟切片。
1.為了您的安全和健康，請采取必要的防范措施。操作時(shí)應(yīng)戴一次性手套，穿實(shí)驗(yàn)服，避免與皮膚接觸。
2.本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
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答：可能的原因有：
1、膠濃度不對，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調(diào)整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長孵育時(shí)間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進(jìn)行混合，如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關(guān)文獻(xiàn)確定；
5、標(biāo)本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設(shè)置陽性對照比對結(jié)果，增加標(biāo)本上樣量。
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