
本通用型強(qiáng)力抗原修復(fù)液的抗原修復(fù)效果總體上要優(yōu)于常用的檸檬酸鈉抗原修復(fù)液。細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后,會(huì)導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link),從而遮蔽樣品的抗原位點(diǎn),導(dǎo)致免疫染色時(shí)染色信號(hào)減弱,甚至出現(xiàn)一些假陽(yáng)性染色結(jié)果。
本抗原修復(fù)液采用了可以直接逆轉(zhuǎn)醛類(lèi)固定試劑交聯(lián)作用的試劑,可以非常有效地去除醛類(lèi)固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)會(huì)大大改善石蠟切片的免疫染色效果,但對(duì)于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時(shí),可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來(lái)看,無(wú)論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定的樣品,進(jìn)行抗原修復(fù)都會(huì)有效去除蛋白之間的交聯(lián),充分暴露抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
本產(chǎn)品對(duì)石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片或涂片等樣品均適用。

1、塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導(dǎo)致的玻璃破碎。
2、本抗原修復(fù)液使用前必須用重蒸水或Milli-Q水稀釋10倍,配制成抗原修復(fù)液(1X)。
3、通用型強(qiáng)力抗原修復(fù)液(10X)含有低濃度的有毒試劑,請(qǐng)注意小心防護(hù)。
4、本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn),本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息,通過(guò)去修飾確定蛋白實(shí)際大小;
2、樣本處理過(guò)程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時(shí)在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強(qiáng),建議使用特異性強(qiáng)的抗體;
5、抗體孵育時(shí)間過(guò)久,建議減少抗體孵育時(shí)間;
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過(guò)程及強(qiáng)度;
8、底物顯色與曝光時(shí)間過(guò)長(zhǎng),建議縮短顯色及曝光的時(shí)間。
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