
培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn),但支原體污染在光學(xué) 顯微鏡下不可見(jiàn),必須通過(guò)特定的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)支原體污染的方法有很多種包括 支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)以及DNA熒光染色檢測(cè)。上述檢測(cè)方法 中,除DNA熒光染色檢測(cè)外操作步驟相對(duì)比較煩瑣并且所需時(shí)間較長(zhǎng)。 普美生物的支原體染色檢測(cè)試劑盒是經(jīng)典的利用DNA熒光染色法在培養(yǎng)細(xì)胞中原位染色檢測(cè) 支原體或其它原核生物的試劑盒,主要用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。其原理是 利用熒光染料Hoechst33258檢測(cè)支原體污染。這種染料會(huì)結(jié)合到DNA的A-T富集區(qū)域,因?yàn)?支原體的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可將其染色而被檢測(cè)到。被支原體污染的細(xì)胞 經(jīng)染色后在細(xì)胞周?chē)煽吹皆S多大小均一的藍(lán)色熒光小點(diǎn),即為支原體的DNA染色斑,說(shuō)明 有支原體污染。 Hoechst33258的大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為 460nm;Hoechst33258和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長(zhǎng)為352nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。 本試劑盒的熒光染色可快速、有效、高靈敏度地檢測(cè)支原體污染。
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可能是因?yàn)檠彘L(zhǎng)期儲(chǔ)存或離心不充分。
可能是因?yàn)檠宸磸?fù)凍融或儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
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