JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。可以檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線(xiàn)粒體膜電位。在線(xiàn)粒體膜電位較高時(shí)，JC-1聚集在線(xiàn)粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，可以產(chǎn)生紅色熒光；在線(xiàn)粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線(xiàn)粒體的基質(zhì)中，此時(shí)JC-1為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過(guò)熒光顏色的轉(zhuǎn)變來(lái)檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來(lái)衡量線(xiàn)粒體去極化的比例。
線(xiàn)粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。
JC-1單體的大激發(fā)波長(zhǎng)為514nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為529nm；JC-1聚合物的大激發(fā)波長(zhǎng)為585nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為590nm。實(shí)際觀察時(shí)，使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。
JC-1用于檢測(cè)細(xì)胞的線(xiàn)粒體膜電位時(shí)常用的濃度范圍為1～20μg/mL，對(duì)于很多細(xì)胞適宜采用的JC-1濃度為10μg/mL。
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1、可選擇孔徑0.22um的PVDF膜或者NC膜，轉(zhuǎn)膜時(shí)間縮短，另外可采用Tricine-SDS-PAGE體系；
2、也可以選擇PSQ 膜，同時(shí)縮短轉(zhuǎn)移時(shí)間。也可以將兩張膜疊在一起，再轉(zhuǎn)移。其他按步驟即可。
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