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蛋白酶抑制劑混合液(100x)
貨號:PMK0420
一鍵復制產品信息
價格:
240.00
規格:
1ml
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現貨
本產品4 ℃運輸,保存于-20℃,保質期 12個月。
Details
產品詳情
  • 產品介紹

    蛋白酶抑制劑是指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團結合,使蛋白酶活力下降甚至消失但不使蛋白變性的物質,并維持原有的蛋白間相互作用。細胞或組織提取物等樣品中含有許多內源性的蛋白 酶、磷酸酶等,容易導致提取物中的蛋白降解或去修飾,從而影響后續的蛋白檢測。因此在提取物等樣品中添加適當的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法。

    蛋白酶抑制劑混合液(100X) 是一種通用型用于細胞或組織蛋白提取等的蛋白酶抑制劑混合物,主要由 AEBSF、Aprotin in、Bestatin、E-64、Leupep tin、Pep statin A等組成,不含EDTA。本產品 可以有效抑制常規細胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性,如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸 蛋白酶、蘇氨酸、胃蛋白酶、胰蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和木瓜蛋白酶等。其中 AEBSF 是一種水溶 性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑,其抑制常數與PMSF抑制常數相似,可以有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纖溶酶、激肽釋放酶和凝血酶等蛋白酶,作為PMSF的替代物,AEBSF 的毒性更低、水 溶性和水溶液穩定性更好。Aprotin in 是絲氨酸蛋白酶的競爭性可逆抑制劑;Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑;E64 是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑;Leupep tin 是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑。

    本產品使用便捷,通常以1:100的比例將蛋白酶抑制劑混合液(100X)加入裂解液中,即可用于常規的細胞或組織蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解,提取出的蛋白可以用于Western Blot、免疫共沉淀等試驗。


  • 操作步驟

    1. 開蓋前請低速離心一下,以便將黏附于管壁的液體甩至管底。

    2. 本蛋白酶抑制劑混合液為100X的儲存液,使用時按照1:100的比例加入到裂解液中(例如1ml裂解液中加入10ul蛋白酶抑制劑混合液),混勻后即可使用。

    3. 待所需的抑制劑添加完畢并混勻后,就可以開始進行常規細胞或組織的裂解和蛋白提取。

  • 注意事項

    1. 本產品可以適當分裝后保存,并應在臨使用前添加到裂解液等適當溶液中。

    2. 本產品保存時盡量減少反復凍融的次數,以免失效。

    3. 本產品未添加 EDTA,可以自行選擇性加入使用。若后續用于檢測提取液中金屬蛋白酶活性,則不宜添加EDTA。

    4. 本產品中含有的蛋白酶抑制劑對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

    5. 含有蛋白酶抑制劑混合液的裂解液宜現用現配,不宜配制后凍存待后續使用。

    6. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。

    7. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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已發表文獻
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Product Q&A FAQ
產品問答FAQ
  • Western Blot(WB)實驗中有很多雜帶咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;

    2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;

    3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;

    4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;

    5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;

    6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;

    7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;

    8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。


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