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在 1986 年診斷時(shí)從一名 65 歲患有急性髓性白血病 (AML FAB M4) 的男

性的外周血中建立；文獻(xiàn)中描述了表達(dá)視黃酸受體基因的細(xì)胞；細(xì)胞系攜帶

DNMT3A R635W 突變

1）來源：65 歲 急性髓性白血病男性的外周血

2）形態(tài)：懸浮的單個(gè)圓形至橢圓形細(xì)胞

3）含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4）規(guī)格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞：

（1）1mL 凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收

到后-80 度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25 瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?4 或 5X 顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中約 2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況，若細(xì)胞密度在 70%-80%左右，可進(jìn)行傳代，首次傳代建議 1:2(也可根據(jù)情況調(diào)整)，若細(xì)胞生長(zhǎng)不足 70%，建議消化處理后，轉(zhuǎn)移到新的 T25 培養(yǎng)瓶（1：1）繼續(xù)培養(yǎng)。

4）半貼細(xì)胞或貼壁不牢（懸浮）細(xì)胞：T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中約 2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況，若細(xì)胞密度在 60%以下，客戶需收集 T25 瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細(xì)胞生長(zhǎng) 70%-90%對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代，傳代時(shí)需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收。

5）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 T25 培養(yǎng)瓶 1：2 傳代 。

1）培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基，10%FBS，1%P/S

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱

濕度為 70%-80%。

3)凍存液：90%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。放 2-8℃度冰箱冷卻 30min 左右