
從一名患有急性髓性白血病 AML FAB M5a 的 20 歲男性的外周血中建立,該男性在初始骨髓增生異常綜合征(MDS,難治性貧血伴原始細胞過多,RAEB)后于 1995 年復發(fā);描述攜帶 FLT3 的內部串聯(lián)復制;FLT3 蛋白不表達;細胞系攜帶 CBL deltaExon8 突變體;MOLM-14 (ACC 777) 的姐妹細胞系

1)來源:20 歲 男性 外周血
2)形態(tài):淋巴母細胞,大多數(shù)細胞呈圓形懸浮生長
3)含量:>1x10^6 細胞數(shù)
4)規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。

干冰運輸及復蘇好存活細胞:
(1)1mL 凍存管包裝干冰運輸,收到后-80 度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25 瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在 4 或 5X 顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中約 2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在 70%-80%左右,可進行傳代,首次傳代建議 1:2(也可根據(jù)情況調整),若細胞生長不足 70%,建議消化處理后,轉移到新的 T25 培養(yǎng)瓶(1:1)繼續(xù)培養(yǎng)。
4)半貼細胞或貼壁不牢(懸?。┘毎篢25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中約 2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在 60%以下,客戶需收集 T25 瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細胞生長 70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收。
5)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 T25 培養(yǎng)瓶 1:2 傳代 。

1)培養(yǎng)基:RPMI-1640 培養(yǎng)基,10%FBS,1%P/S
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
3)凍存液:90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配
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答:可能的原因包括培養(yǎng)基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養(yǎng)基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù),如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發(fā)現(xiàn)問題;
4. 定期更換培養(yǎng)基,保持細胞營養(yǎng)充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
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