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Rhodamine 123是一種可對活細胞線粒體染色的細胞染色試劑。它可透過細胞膜且在活細胞的線粒體內聚集，并發出黃綠色熒光。Rh123的大激發波長為507nm，大發射波長為529nm。

Rh123用于對許多種細胞進行染色，包括植物細胞和細菌。由于細胞內ATP的量與Rh123的熒光強度之間有相關性，因此Rh123被應用于檢測細胞內的ATP。Rh123還用于癌癥研究。

（1）將0.4mg Rh123溶解到1mL DMSO中制備成1mM Rh123-DMSO溶液。

（2）用載玻片準備細胞。細胞數目應為5×10⁴～5×10⁵個/mL。

（3）孵育該載玻片，用PBS或Hank’s液洗滌細胞。

（4）用培養基稀釋1mM Rh123溶液以制備1～20μM Rh123緩沖液。

（5）將Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育30分鐘至1小時。

（6）去除Rh123緩沖液并用培養基洗滌細胞（洗滌細胞后為了固定，加入10%福爾馬林緩沖液并孵育15～20分鐘，接著用PBS洗滌）。

（7）用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。