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Western 快速轉(zhuǎn)膜緩沖液(10×)
貨號:PMK0564
一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
價格:
150.00
規(guī)格:
500ml
貨期:
現(xiàn)貨
本產(chǎn)品常溫運輸,保質(zhì)期 12個月。
Details
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品簡介

    本產(chǎn)品轉(zhuǎn)膜快速,安全無毒害。使用本快速轉(zhuǎn)膜液時,在400mA恒流轉(zhuǎn)膜約20-25分鐘即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜或硝酸纖維素膜(NC膜)等印跡膜上,并且產(chǎn)熱少,轉(zhuǎn)膜效果好。而相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液需要轉(zhuǎn)膜更長時間。本產(chǎn)品為預(yù)混液,使用前只需要用水和乙醇配制,但無需調(diào)節(jié)pH值和使用劇毒的甲醇等試劑。本產(chǎn)品適合手工配制的Tris-Gly和Hepes等緩沖系統(tǒng)的SDS-PAGE凝膠的轉(zhuǎn)膜,也適合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris系統(tǒng)等預(yù)制膠的轉(zhuǎn)膜,使用后轉(zhuǎn)膜液可以回收,回收后可以再使用1-2次。

  • 使用步驟

    a.   取Western 快速轉(zhuǎn)膜液(10×)100ml倒入到潔凈的容器中,然后加入100ml 無水乙醇,后再補充去離子水或蒸餾水800ml定容至1L,混勻后即得到1×的Western快速轉(zhuǎn)膜液;

    b.  如果Western快速轉(zhuǎn)膜液使用前 4℃預(yù)冷,轉(zhuǎn)膜效果更好。沒有用完的快速轉(zhuǎn)膜液可在常溫或 4℃保存,通常兩周內(nèi)可以正常使用。當(dāng)轉(zhuǎn)膜液顏色變?yōu)闇\棕色或黃褐色時,應(yīng)該丟棄。

    c.  400mA 恒流,20-25 分鐘完成轉(zhuǎn)膜,推薦使用恒流轉(zhuǎn)膜。對于大分子量蛋白,可適當(dāng)增加轉(zhuǎn)膜時間。由于使用本產(chǎn)品時產(chǎn)熱少,轉(zhuǎn)膜時可以僅在轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)用冰盒降溫即可。如果同時將整個轉(zhuǎn)膜槽置于冰浴中降溫,轉(zhuǎn)膜效果更佳。

  • 注意事項

    1.如果轉(zhuǎn)膜液顏色變成淺棕色或黃褐色,應(yīng)該丟棄。

    2.由于使用本產(chǎn)品時產(chǎn)熱較少,轉(zhuǎn)膜時可以僅在轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)用冰盒降溫即可。如果同時將整個轉(zhuǎn)膜槽置于冰浴 中降溫,轉(zhuǎn)膜效果更佳。同時也可以考慮轉(zhuǎn)膜液配制好后先在 4℃或者冰浴預(yù)冷。

    3.使用本產(chǎn)品轉(zhuǎn)膜時,如果設(shè)定恒流為 400mA,無論是同一個轉(zhuǎn)膜槽中 1 或 2 塊膠轉(zhuǎn)膜,電壓在開始時通常為200V 左右。由于轉(zhuǎn)膜過程中,轉(zhuǎn)膜液溫度會逐漸升高,電阻變小,所以結(jié)束時電壓通常為100-150V。轉(zhuǎn)膜效率和電場強度(electric field strength,用 E 表示)相關(guān),而電場強度主要和電壓及電極之間的距離相關(guān),即 E=U/d。

    4.由于用于轉(zhuǎn)膜的電源品牌和型號的不同,一方面高電流差異較大,另一方面功率也會有較大差別。通常大功率的電源相對貴一些,也更適合用于轉(zhuǎn)膜。有些電源會自動降低電壓或電流,有些則會報錯并停止轉(zhuǎn)膜。對于出現(xiàn)停止轉(zhuǎn)膜的情況,需要調(diào)低電流或電壓,或者選擇功率更大的電源。

    5.轉(zhuǎn)膜時轉(zhuǎn)膜液的溫度、凝膠的參數(shù)(如數(shù)量、厚度、離子濃度、丙烯酰胺濃度等)、濾紙的厚度、同時使用 的轉(zhuǎn)膜槽數(shù)量、轉(zhuǎn)膜液的離子濃度、轉(zhuǎn)膜液的體積、轉(zhuǎn)膜液使用的次數(shù)等都可能會影響電流和電壓。如果需 要同時使用 2 個或以上的轉(zhuǎn)膜槽,建議使用高電流的大功率電源,或者設(shè)定較低的電流或電壓進(jìn)行比較長時 間的轉(zhuǎn)膜。

    6.轉(zhuǎn)膜時,如果出現(xiàn)報錯而停止,需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過載,或者是如轉(zhuǎn)膜液過多或過少、 轉(zhuǎn)膜槽的短路或斷路等異常情況。

    7.本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

    8.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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說明書/COA下載
Published literature
已發(fā)表文獻(xiàn)
  • 更新中...

Product Q&A FAQ
產(chǎn)品問答FAQ
  • Western Blot(WB)實驗中有很多雜帶咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;

    2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;

    3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;

    4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;

    5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;

    6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;

    7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強度;

    8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。


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